LC-kolonner GPC-SEC Agilent BioSEC

Agilent BioSEC

Agilent har ett brett urval av SEC-kolonner som ger de valmöjligheter man behöver för perfekta separationer baserat på analyter och metodparametrar.

Nedanstående tabell och diagram ger en översikt över vilken kolonn och porstorleksområde som är rekommenderad för respektive provtyp. Vi rekommenderar att börja metodutveckling med AdvanceBio SEC-kolonnerna.

Agilent BioSEC

Agilent AdvanceBio SEC kolonner med 500 och 1000 Å porer

Adeno-associerade virus (AAV), virusliknande partiklar (VLP), oligonukleotider och lipid-nanopartiklar (LNP) representerar nästa generations bioterapeutika för cell- och genterapi, samt vacciner. För att karakterisera dessa nya och utmanande bioterapeutika krävs avancerad teknik.

För denna typ av applikationer har Agilent utökat AdvanceBio SEC sortimentet med kolonner i porstorlekarna 500Å och 1000Å. AdvanceBio SEC 500Å och 1000Å är idealiska för analys av aggregat av större biomolekyler (> 1 MDa), nästa generations bioterapeutiska läkemedel såsom adeno-associerade virus (AAV) och virusliknande partiklar (VLP).

>> High-Speed High-Resolution Aggregate Analysis of Ultralarge Biotherapeutics.pdf

Den höga upplösningen som möjliggörs av AdvanceBio SEC 500 Å och 1000 Å små partiklar (2.7µm), stor porvolym och minimala tailing gör analys av aggregat möjligt med hög tillförlitlighet och öppnar möjligheter att spara tid genom att öka flödeshastigheten eller byta till en kortare kolonnlängd.

AdvanceBio SEC-kolonner har låg bakgrund efter konditionering av kolonnerna med den mobila fasen. Detta gör dem idealiska för ljusspridningsdetektering, liksom för andra detekteringstekniker såsom fluorescens eller masspektrometri.

Nya AdvanceBio SEC 500 Å-kolonner för aggregat av AAV
Adenoassocierade virus (AAV) är en populär vektor för utveckling av nya cell- och genterapier, och precis som för alla andra bioterapeutika är bildandet av aggregat en kritisk kvalitetsegenskap som måste följas noga. Nya AdvanceBio SEC 500 Å-kolonner möjliggör snabba, robusta och högupplösta separationer för noggrann och reproducerbar analys av AAV aggregat.
>> Improved Wide Pore Size Exclusion Chromatography Columns for AAV Analysis Method development using analytical LC instrumentation.pdf

Nya AdvanceBio SEC 1000 Å-kolonner för aggregat av AAV av virusliknande partiklar (VLP)
Virusliknande partiklar (VLP) är ”self-assembled” proteinstrukturer som liknar virus på utsidan men som inte innehåller något viralt genetiskt material. Analys av aggregat är en kritisk kvalitetsegenskap för VLP:er, som kan variera avsevärt i storlek från 20 till 150 nm, vilket gör det utmanande att välja den optimala tekniken innan du ens kommer till valet av SEC-porstorlek. De nya AdvanceBio SEC 1000 Å-kolonnerna kan användas för VLP:er och andra bioterapeutiska molekyler med en diameter på upp till ~80 nm, som i exemplet här med en VLP på ~50 nm.
>> Robust Wide Pore Size Exclusion Columns for Virus-Like Particles Analysis.pdf

2022 förvärvade Agilent Polymer Standards Service (PSS) vilket utökade Agilents produktsortiment för GPC och SEC analyser. Förvärvet breddade Agilents portfölj av SEC-kolonner och standarder.

PSS - PROTEEMA

PROTEEMA-kolonner är väl lämpade för SEC analyser av naturliga och syntetiska proteiner, peptider och enzymer med molekylvikter från 100 till 7 500 000 Da. PROTEEMA-kolonner finns även som en bioinert konfiguration.

PSS - MAB

MAB-kolonner är utmärkta för SEC-analyser av monoklonala antikroppar (mAbs), immunglobulin G (IgG) och proteiner med molekylvikter från 100 till 1 000 000 Da. Denna mixed-bed kolonn med 3 µm partiklar passar bra för snabba metoder med ljusspridning.

AdvanceBio SEC

AdvanceBio SEC-kolonnerna har en unik coating som reducerar sekundära interaktioner vid analys av proteiner, antikroppar och ADCs (antibody drug conjugates). De ger hög upplösning och känslighet för exakt kvantifiering och reproducerbarhet. Konsekventa resultat erhålls från kolonn till kolonn, batch till batch och labb till labb, vilket säkerställer att metoder kan överföras mellan avdelningar och platser.

AdvanceBio SEC-kolonner finns i två partikelstorlekar (1.9µm och 2.7µm) och fyra porstorlekar (120Å, 130Å, 200Å och 300Å):

AdvanceBio SEC 1.9 µm, 120Å eller 200Å

AdvanceBio SEC 1.9µm – sub 2µm-kolonner optimerade för att förbättra upplösningen och ge snabbare separationer vid SEC-analys med både HPLC och UHPLC
120Å-kolonnen är optimerad för peptider och små proteiner
200Å-kolonnen är optimerad för analys av antikroppar (monomer, aggregat och fragment) samt antikroppskonjugat (ADCs)
Unik hydrofil coating - ingen diolfas, inga hydrofoba interaktioner och inga silanoler. Förhindrar sekundära interaktioner och proteinadsorption.
Maximerad porstorlek och porvolym
Kraftigt tvärbunden - kemiskt stabil fas
Kompatibel med antingen LC-UV, 2D-LC och LC/MS (nativt eller denaturerat tillstånd)
Finns med 4.6 mm innerdimeter, kräver LC-system med låg systemvolym
Tryckgräns 620 bar

AdvanceBio SEC 120Å och 200Å

AdvanceBio SEC 2.7 um, 130Å eller 300Å

Optimerad porstorlek
– 300Å för större bioterapeutiska proteiner, men även för mAbs och ADCs
– 130Å för ett brett spektrum av mindre proteiner och polypeptider
Optimerad porvolym - stor porvolym för maximal upplösning
Optimerad partikelstorlek - 2,7 um fullt porösa partiklar för hög effektivitet
Optimerad ytkemi - patentskyddad polymerisk hydrofil yta för att minska sekundära interaktioner
Flera kolonndimensioner ger valmöjligheter för hastighet och upplösning. Möjlighet att seriekoppla kolonner med samma eller olika porstorlek för ökad upplösning respektive ökat linjärt molekylviktsintervall.

AdvanceBio SEC 130Å och 300Å

BioSEC-3

Bio Sec-3 ger hög upplösning av mindre biomolekyler

Robusta 3 µm partiklar ”kotade” med ett neutralt hydrofilt lager
Klarar de flesta vattenlösliga buffertar
Stabila både vid höga pH, höga eller låga saltkoncentrationer.
Lämpliga för MS-applikationer

BioSEC-3

BioSEC-5

Bio Sec-5 för större biomolekyler.

Robusta 5 µm partiklar belagda med ett neutralt hydrofilt lager
Klarar de flesta vattenlösliga buffertar
Stabila både vid höga pH, höga eller låga saltkoncentrationer
Porstorlek upp till 2000 Å för vaksiner och andra större biomolekyler

BioSEC-5

ProSEC 300S

ProSEC 300S är speciellt framtagen för analys av globolära proteiner.
Robusta partiklar med optimerad porsstorlek ger ett stort linjärt område. Analysen kan oftast utföras med en enda kolonn vilket ger kortare analystider.