AdvanceBio Spin-kolonner och 96-platta
AdvanceBio Spin-kolonner och 96-platta - snabb och effektiv upprening av prover för analys av biomolekyler - gelfiltrering med centrifugering.
AdvanceBio Spin-kolonner är utformade för effektiv provberedning av proteiner eller oligonukleotider i vattenhaltig lösning, och bevarar proteinets nativa struktur, med lämplig jonstyrka och pH. Överskott av salt eller på annat sätt inkompatibla matriskomponenter, såsom små molekyler kan störa analysen, vilket leder till dåliga eller felaktiga resultat. Med AdvanceBio Spin-kolonner kan enkelt och snabbt, överskott av salter eller oönskade små molekyler från provmatrisen avlägsnas. AdvanceBio Spin-kolonner kan också användas för att byta mellan olika buffertförhållanden.
Dessa gelfiltrerings spinnkolonner finns för analytisk och semipreparativ skala för enstaka prover, samt i 96-plattor för högre kapacitet. Kolonnbädden innehåller samma tvärbundna dextranpartiklar i alla tre formaten, så att användarna enkelt kan skala upp eller ned antalet prover eller volymen.
Finns i tre format: individuella spin-kolonner för provvolymer < 100 µL eller < 1000 µL, och 96-provplattor för prover < 50 µL.
Kompatibel med de vanligaste buffertarna och lösningar som innehåller upp till 0,2 M NaOH, 0,2 M HCl, 1 M ättiksyra, 8 M urea, 6 M guanidin HCl, 1 % SDS, 24 % etanol, 30 % propanol eller 30 % acetonitril.
Tre primära arbetsflöden där AdvanceBio Spin-kolonner och 96-provplattor bör ingå är
- RP LC och LC/MS på intakta proteiner och subenheter
- Upprening av korta syntetiska oligonukleotider före antingen analytisk karakterisering eller vidare användning i annan applikation
- Byte av buffert för glykoproteiner från primära amin innehållande buffertar före Gly-X digestion och InstantPC-märkning av frigjorda N-glykaner
AdvanceBio Spin rekommenderas för
- proteiner >5 kDa
- oligonukleotider >10 bp/nt
- nanopartiklar >2 nm i diameter
>> A Quick and Efficient Sample Cleanup for Biomolecule Analysis.pdf
Gelfiltrering, eller storleksfördelningskromatografi (SEC), är separation baserad på molekylernas storlek. I det här fallet används gelfiltrering som en separation av olika molekylviktsgrupper, där provkomponenter över en molekylviktsgräns separeras från allt under den. Proteiner som är större än 5 kDa eller oligonukleotider som är längre än 10bp är för stora för att effektivt tränga in i partiklarnas porstruktur och elueras därför först som en enda grupp. Mindre matriskomponenter och buffertsalter kan mer effektivt röra sig in i de små porerna i partiklarna och därmed stanna kvar på kolonnen längre.
AdvanceBio Spin < 1000 µL-kolonner
Spin-kolonnerna i semipreparativ skala som ingår i artikelnummer 1980-1105 är avsedda att användas med 50 ml centrifugrör; ett för tvättsteg och ett andra för uppsamling av prov. Själva centrifugeringskolonnen hålls på plats i toppen av röret med en adapter. Varje förpackning (art.nr 4.1980-1105) innehåller fyra återanvändbara adaptrar. Fler kan köpas till vid behov, 8p, 4.1980-1106. Agilent erbjuder centrifugrör, 4.5610-2049, 25/pk, eller 4.190065200, 500/pk.
AdvanceBio Spin 96-plattor
AdvanceBio Spin 96-plattorna för fler prover kräver separata 96-plattor för tvätt- och uppsamling. För tvättsteg rekommenderas art.nr 4.5043-9308, och för uppsamling av provet rekommenderas en 96-platta med V-formade brunnar, till exempel 4.5043-9312. Under centrifugeringen kommer AdvanceBio Spin 96-plattan att staplas ovanpå antingen tvätt- eller provuppsamlingsplattan, så se till att centrifugen har plats för de staplade plattorna (5,1 cm höjd).
