HIC

Hydrofob interaktionskromatografi (HIC) är en av de mest använda metoderna för separation och upprening av proteiner i dess nativa form. HIC används i flertalet olika analyser som till exempel för att karaktärisera oxiderade varianter av proteinbaserad läkemedel, isolera proteinkomplex, studera felveckning av proteiner och karaktärisera ADC (Antibody Drug Conjugate).

HIC separerar proteiner baserat på interaktioner mellan hydrofoba grupper på proteinet och den hydrofoba stationärfasen. HIC erbjuder fördelar då mobilfasen, i jämförelse med reversed phase, innehåller lite eller inget organiskt lösningsmedel vid fysiologiskt pH, vilket möjliggör analys av strukturförändringar i den nativa formen. För HIC är den mobila fasen lösningar med hög salthalt. När salthalten ökas ökar också hydrofobiciteten på proteinernas yta som därmed skapar interaktioner med stationärfasen. Proteinerna elueras från kolonnen när salthalten minskas, de minst hydrofoba proteinerna eluerar först och de mest hydrofoba proteinerna eluerar sist.

>> Läs mer om HIC